當(dāng)前位置：檢測(cè)ELISA試劑盒對(duì)牛乳中
初步組裝試劑盒并對(duì)試劑盒的各組分的穩(wěn)定性進(jìn)行了檢測(cè)和優(yōu)化，成功建立了能在6個(gè)月內(nèi)維持穩(wěn)定的ELISA試劑盒，并以所組建的試劑盒對(duì)牛奶樣品中的添加藥物進(jìn)行了測(cè)定。利用5C0雜交瘤細(xì)胞株的小鼠腹水單抗建立了檢測(cè)SM殘留的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法。采用包被抗原稀釋度∶3200，腹水抗體的工作濃度∶.6×05，尺度曲線線性方程為y=.0522-0.3276x(0～000ng/ml)，半數(shù)按捺濃度為93.22ng/ml，檢測(cè)限約為5ng/ml。氨基糖苷類(lèi)抗生素是一類(lèi)應(yīng)用廣泛的廣譜抗菌藥物，主要包括(SM)、(GM)、(KM)等，對(duì)奶牛乳房炎、等有很好的療效，常用作獸醫(yī)臨床治療及飼料藥物添加劑。對(duì)患乳房炎奶牛進(jìn)行肌肉打針和乳房給藥治療，采用本試劑盒測(cè)定牛奶中的殘留濃度，證明用藥后牛奶的廢棄期分別為至少2d和4.5d。分別采用CMO法、活化酯法、戊二醛法合成了的5種人工抗原，從免疫原性及不亂性等方面臨5種抗原進(jìn)行比較，*選擇活化酯法合成的BSA-SM/b作為免疫抗原，通過(guò)雜交瘤技術(shù)獲得株能不亂分泌抗特異性單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株5C0。通過(guò)實(shí)驗(yàn)比較了5種樣品處理方法，選擇用Careez法處理并4倍稀釋后用于測(cè)定。為探索一種能夠快速有效的檢測(cè)牛奶中殘留的方法，本研究采用單克隆抗體技術(shù)和酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定等技術(shù)，合成人工抗原，制備出抗單克隆抗體，建立了檢測(cè)牛奶中SM殘留的ELISA測(cè)定法，組建成快速檢測(cè)ELISA試劑盒并進(jìn)行了優(yōu)化和實(shí)際應(yīng)用。
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