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技術文章

做到這些可減少Elisa試劑盒故障的發生!
點擊次數:676 更新時間:2020-12-27
  ELISA是指以酶作為標記物、以抗原和抗體之間免疫結合反應為基礎的固相吸附測定方法。因此,一個ELISA測定試劑,其有機組成部分包括:包被的抗原或抗體的固相支持物,即聚苯乙烯塑料微孔或試管;酶標記的抗體或抗原和酶的反應底物等。
 
  抗原或抗體的固相化,并不影響其免疫結合活性,酶標記的抗體或抗原亦是如此,并且標記酶的活性不因標記過程而喪失。整個測定中,醫學|教育網搜集整理抗原與抗體的結合反應在固相支持物上進行,反應結果的判斷,以酶與其底物作用后的顯色或產生熒光或發光反應為標準,顯色或產生熒光或發光的強度,與臨床標本中待測物的濃度成正比或反比關系。目前國內的ELISA試劑盒均以酶的顯色反應來完成測定。
 
  Elisa試劑盒實驗反應時間注意事項:
 
  、在備孔稀釋好待測樣品和標準品;
 
  2、上板:應從后一孔上完板開始計時,以確保反應時間;
 
  3、加底物:應從加一孔開始計時,以確保加終止液時的反應時間是5分鐘。
 
  ELISA試劑盒注意事項:
 
  、標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染,菌體中可能含有內源性HRP,也會產生假陽性反響。保存過久可發作聚合在ELISA中可使本底加深。
 
  2、凍住標本溶解后,蛋白質局部濃縮,散布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛混合,不要在混勻器上激烈震蕩。
 
  3、污濁或有沉積的標本應先離心或過濾,弄清后再檢測。
 
  4、反復凍融會使蛋白效價下降,所以代測樣本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。

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