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技術(shù)文章

購(gòu)買Elisa試劑盒前,做好攻略了嗎?
點(diǎn)擊次數(shù):689 更新時(shí)間:2021-04-22
  Elisa試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測(cè),自從60-70年代問世以來,得到科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣,尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。
 
  Elisa試劑盒的選購(gòu)要點(diǎn):
 
  一、你要明確研究種屬:
 
  一般來說,都會(huì)在產(chǎn)品名稱上標(biāo)明種屬,檢索種屬的常用語言為英文。
 
  如果您需對(duì)不同物種的同一因子進(jìn)行定量,建議優(yōu)先尋找適用于多個(gè)種屬的 ELISA 試劑盒,產(chǎn)品介紹中會(huì)注明「Multi-species」。
 
  二、要明確樣本類型:
 
  不同驗(yàn)證樣本類型不同,即使同一不同試劑盒,其驗(yàn)證樣本類型也不盡相同。特別是復(fù)雜的血漿樣本,根據(jù)樣本處理方式的差異,分為 EDTA 血漿、肝素抗凝血漿和檸檬酸鹽血漿,因此購(gòu)買前需仔細(xì)核對(duì)。
 
  三、要會(huì)預(yù)測(cè)自己的目標(biāo)因子的濃度
 
  一般來說,待測(cè)因子可以根據(jù)經(jīng)驗(yàn)或資料獲得參考的檢測(cè)范圍,且正常人與疾病狀態(tài)存在差異。如熱門炎癥因子 IL-6,正常人血清中濃度為 3.3 pg/mL,病人會(huì)顯著增高,CAR-T 回輸病人血清中的 IL-6 濃度甚至為正常人的 200 倍以上。
 
  因而,必要時(shí)進(jìn)行樣本的稀釋及選擇合適檢測(cè)范圍的試劑盒十分重要。
 
  若濃度太低,可選擇高敏試劑盒;若不確定待測(cè)濃度或樣本間濃度差異較大,建議使用檢測(cè)動(dòng)態(tài)范圍更寬的化學(xué)發(fā)光法ELISA試劑盒。
 
  如同樣為 IL-6 ELISA 試劑盒,各類型檢測(cè)范圍差異較大,需要根據(jù)實(shí)際情況選擇合適的試劑盒。
 
  四、檢查試劑盒進(jìn)行過哪些質(zhì)控
 
  質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)在說明書中即可找到,在購(gòu)買前檢查試劑盒是否進(jìn)行過嚴(yán)格的質(zhì)控實(shí)驗(yàn),包括批次內(nèi)(Intra-Assay)及批次間(Inter-Assay)、摻入回收實(shí)驗(yàn)、線性稀釋實(shí)驗(yàn)及交叉反應(yīng)測(cè)試等,每個(gè)數(shù)據(jù)建議都看一下,確保*的結(jié)果重現(xiàn)性及準(zhǔn)確性。
 
  五、確定需檢測(cè)的因子數(shù)量
 
  如果待測(cè)因子超過 5 個(gè),且樣本量較小時(shí),單因子 ELISA 檢測(cè)方法并不是較佳選擇。
 
  建議考慮多因子檢測(cè)方法,如固相芯片(樣本數(shù)量一般 5 個(gè)以內(nèi),檢測(cè)指標(biāo)可達(dá)上百個(gè))及 Luminex 液相芯片方法 (檢測(cè)樣本多達(dá) 80 個(gè),檢測(cè)指標(biāo)多達(dá) 50 個(gè))或微流控 ELISA 檢測(cè)系統(tǒng) Ella。
 
  可節(jié)約樣本及時(shí)間成本,也可保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。
 
  六、預(yù)算評(píng)估
 
  預(yù)算往往是大家優(yōu)先考慮的,實(shí)際上,不能夠一味講究產(chǎn)品價(jià)格,更需要考慮性價(jià)比。生物學(xué)是嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué),一致性的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是基金、文章等評(píng)審過程中的因素,即使低廉的價(jià)格,不能夠重現(xiàn)結(jié)果,也是資源的另一種浪費(fèi)。

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