細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

TU-138人喉癌細(xì)胞

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞別稱；Tu-138; Tu138; 人喉癌細(xì)胞

種屬來源；人

組織來源；喉

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

STR位點(diǎn)；Amelogenin：X;CSF1PO：12,13;D5S818：12;D7S820：10;D13S317：12;D16S539：8,9;TH01：8;TPOX：10,11;vWA：15,16

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

細(xì)胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測；無

培養(yǎng)基；1640+10%FBS+1%P/S

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

防御素β113(DEFβ113)重組蛋白 Recombinant Defensin Beta 113 (DEFb113)

CLIC4 Protein Human 重組人 CLIC4 蛋白

SEMA5A重組小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白 Protein

FCGRT & B2M Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 FCGRT & B2M Heterodimer 蛋白

TSPAN8重組人 TSPAN8 / Tetraspanin 8 / TM4SF3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

EGF重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

70kDa熱休克蛋白1樣蛋白(HSPA1L)重組蛋白 Recombinant Heat Shock 70kDa Protein 1 Like Protein (HSPA1L)

MKI67重組人 MKI67 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

CLIC4 Protein Human 重組人 CLIC4 蛋白

ACE2 Protein Rat 重組大鼠 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白

小鼠鼠痘病毒(MPV)檢測試劑盒 96T/48T

Human gliadin IgA (Gliadin-IgA) ELISA Kit 人麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)檢測試劑盒

HumangelsonELISAKit 人凝膠原蛋白(gelson)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Duckviruseeritis,DEV檢測試劑盒鴨病毒性腸病毒(DEV)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

增強(qiáng)型DAB顯色溶液A液：10毫升B液：90毫升C液：1毫升

MousecyclophilinA,CyPAELISAKit小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

TU-138人喉癌細(xì)胞小鼠神經(jīng)降壓肽（）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠神經(jīng)B(NKB)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠神經(jīng)A(NKA)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠胰島素樣蛋白3(INSL3)檢測試劑盒 ，英文名： INSL3 ELISA Kit

Mouse urokinase type plasminogen activator (uPA) ELISA Kit 小鼠型纖溶酶原激活物(uPA)檢測試劑盒

Mouseansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit 小鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanCoisolELISAKit人

細(xì)胞BMK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitBMP-7大鼠骨成型蛋白7